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Biocytogen / 日本ジェネティクス ID: J01807

ゲノム編集サービス / 既製品モデル動物 ID: J01807

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プロジェクトデザインから納品まで、厳格な品質管理のもとでスピーディーにサービスをご提供します。

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サービスについて

概要

ゲノム編集モデルは基礎科学研究において大切な役割を果たすだけでなく、抗体医薬品開発過程における多くの重要な問題を解決するものとなります。
Biocytogenは年間1,500件以上のゲノム編集プロジェクトを受託し、世界トップ50の製薬会社やバイオテクノロジー企業、研究機関の70％以上と協同する実績を持つ企業です。プロジェクトデザインから納品まで、厳格な品質管理のもとでスピーディーにサービスをご提供します。

ご提供可能なサービス

  1. ゲノム編集
    【EGE™： マウス・ラットにおけるCRISPR/Cas 9ベースのゲノム編集】
    ・タイムライン：デザインからF1まで6～8ヶ月
    ・厳しい品質管理でランダムな挿入を排除し、オフターゲット切断を回避
    ・大きなフラグメントのノックインも高効率で対応

    【マウスにおける従来のESCベースのゲノム編集】
    ・タイムライン：デザインからF1まで9～11ヶ月
    ・マウス系統：C57BL/6
    ・生殖細胞系列移行保証
  2. 既製品モデル動物
    ・タイムライン：3～4週間（納期が変わる場合があります）
    ・マウス系統：C57BL/6（その他の系統についてはお問い合わせください）
    ・腫瘍、アテローム性動脈硬化、肥満・糖尿病などの既製品モデル動物
  3. 加齢マウス
    ・タイムライン：3週間～10ヶ月以上
    ・マウス系統：C57BL/6、BALB/C、DBA2、FVB、C3H、ICR（outbred）
    ・加齢に伴う疾患の研究に理想的なモデル
    ＊ 加齢マウスについてはこちらのページをご覧ください。

EGE™（Extreme Genome Editing ）　～ Biocytogen社独自開発のプラットフォーム ～

Extreme Genome Editing(EGE™)は、CRISPR/Cas9をベースに、Biocytogen社が独自に開発したゲノム編集技術です。DNA修復機構を非相同末端結合（NHEJ）から相同組み換え修復（HDR）へとシフトさせることで大きなフラグメントのノックイン効率を10～20倍向上させました。
EGE™システムはゲノム編集をさらに高速化し、迅速かつ正確にどの部位のゲノムのDNA 配列でも編集できるようにしました。ゲノム編集の効率が高まると、モデル生物の作製の成功率が上がりコスト節約になるほか、時間が短縮されるなど、様々なメリットがあります。
EGE™プラットフォームでは、ほぼどの遺伝子座においても高精度のDNA 編集が可能です。グローバルノックアウト(KO) ／ノックイン(KI）、コンディショナルノックアウト(cKO) /ノックイン(cKI) 、 点突然変異、レポーターマウスなどの遺伝子改変マウスモデルを作製できます。


fig.1 Extreme Genome Editing System

（fig.1：左）は、ヒト骨肉腫細胞を使用し、設計案をヒト細胞フレームワークタンパク質β-Actin遺伝子ACTBの開始コドンATGとした後、緑色蛍光タンパク質EGFPをノックインすると、ノックインが成功した細胞はEGFP融合β-Actinタンパク質を発現しました。U2OSトランスフェクションではCas9ヌクレアーゼと標的ACTBのsgRNAプラスミドを発現し、両側には約1 kbの長さのホモロジーアームのEGFPドナープラスミドが存在しました。トランスフェクション後フローサイトメトリーで分析すると、基本的なCas9/sgRNA媒介のノックイン効率は1.91 %ですが、EGEシステムではノックイン効率が15.02%に向上しました。（fig.1：右）では、ラットのグリオーマC6細胞と既知コード核膜タンパク質のラットのLmnb1遺伝子をターゲットとしました。このモデルではノックイン効率が0.19%から3.6%に向上しました。

ESC/HR

ESC/HR（ ESC, Embryonic Stem Cell; HR, Homologous Recombination）とは、ドナーDNAとゲノム間の相同組換えを利用してマウスの胚性幹細胞のゲノム編集を行う技術です。遺伝子改造の陽性クローンをマウスの胞胚に注入し、それを育種することで最終的に成体マウスを得ます。Biocytogenが構築したC57BL/6ベースの幹細胞株と培養体系は、約100世代にわたり分化全能性が保証されており、適切な成体マウスが提供されます。 　

厳格な品質管理

  • 染色体異常を除外するための核型分析（ESC/HRターゲティングのみ）
  • ジェノタイピング（PCRおよびDNAシーケンシング）でターゲットフラグメントを確認
  • 厳密なsgRNAデザインでオフターゲット作用を回避
  • 純粋なRNAをインジェクションすることでオフターゲット作用を最小化
  • サザンブロット法でランダムな挿入を除外

サービスの流れ（fig.2）


fig.2 サービスの流れ

複数の遺伝子ターゲティング戦略に対応

Biocytogenのゲノム編集プラットフォームは、以下の遺伝子ターゲティング戦略に対応しています。
  • グローバルノックイン / ノックアウト
  • コンディショナルノックイン / ノックアウト
  • Cre(ERT2)ノックイン
  • 点突然変異ノックイン
  • レポーター遺伝子ノックイン
  • Rosa26遺伝子座ノックイン
  • Tol2導入遺伝子

ご注文に関して

お問い合わせフォーム よりお問い合わせください。

参考価格・納期

価格については都度お問い合わせください

ゲノム編集
サービスメニュー 種別 系統 (以下から選択可能) フラグメントサイズ 遺伝子挿入サイト 納期 納入品
ESC-KO-Mouse
ESC-cKO-Mouse
ESC-KI-Mouse
ESC-cKI-Mouse		 Mouse
 C57BL/6 ≤12 kb 特定のサイト 10～12ヶ月 2 F1
heterozygous
>12 kb
(up to 20 kb)
EGE-KO-Mouse Mouse/Rat
 Mouse:
C57BL/6
BALB/C
DBA/2
NOD SCID




Rat:
SD
Wistar 		≤100 kb 特定のサイト 5～7ヶ月 2 F1
heterozygous
>100 kb(up to 200 kb)
EGE-cKO-Mouse
EGE-KI-Mouse		 ≤4 kb 6～8ヶ月
細胞は3～5ヶ月
4～6 kb
6～8 kb
>8 kb (up to 15 kb)
EGE-Rosa26/H11-cKI-Mouse ≤4 kb
4～6 kb
6～8 kb
>8 kb (up to 15 kb)
EGE-KO-Rat ≤100 kb 5～7ヶ月
>100 kb
(up to 200 kb)
EGE-cKO-Rat
EGE-KI-Rat
EGE-Rosa26-cKI-Rat		 ≤4 kb 6～8ヶ月
4～6 kb
6～8 kb
>8 kb (up to 15 kb)
Tol2
Transgenic-mouse		 Mouse
　		 C57BL/6
BALB/C
DBA/2
NOD SCID		 ≤4 kb ランダム 6～8ヶ月 3～5
Founders
>4 kb (up to 30 kb)

ゲノム編集についての注意事項

  • 生存している動物は、出荷後2週間Biocytogenによって維持することができます。45日後、動物に代わり凍結精子によるバックアップマウス系統を6ヵ月間無料で保管します。その後のマウス精子の保管には、別途費用が発生します。
  • 発送後45日以内に、ユーザーから発送による動物の健康状態の悪化が報告された場合は、再発送を手配することができます。
  • 5～6週間のマウスを納品します。追加のハウジングの場合、別途メンテナンス料が請求されます。
  • 上記の遺伝子ターゲティングマウスのバックグラウンドはC57BL/6 で、ノックインマウスのバックグラウンドがBALB/C になると、別途費用が発生します。
  • すべての遺伝子ターゲティングプロジェクトでは、ジェノタイピングのみが保証され、フェノタイプは保証されません。送料は別途発生します。

既製品モデル動物
製品名 種別 系統 納期 納入品
p53 KO mice Mouse C57BL/6 3～4週間 homozygous
apoe KO mice
ob/ob mice

上記以外にも、Creマウス、tdtomatoレポーターマウス、その他KOマウス / ラットのお取り扱いもございます。これらについては、ライセンス料に加えリカバリー料（＊）が必要となる場合があります。詳細はお問い合わせください。
＊ リカバリー料：凍結精子または凍結胚の状態から動物を再生する際の料金

既製品モデル動物についての注意事項:

  • すべての既製品マウスは、初回購入時にライセンス料が必要となります。同じ系統の2回目以降の購入には必要ありません。
  • p53 KO, apoe KO, ob/ob miceの価格については、ライセンス料（初回のみ）とそれぞれの単価 × 購入数量の金額となります。
  • 1度の注文で複数の種類のマウスを購入する場合は、それぞれの種類に対してライセンス料が必要となります。
  • モデルマウス／ラットおよびその誘導体の知的財産は、すべてBiocytogen社に帰属します。
  • ライセンスを受けたモデルマウス／ラットは、ライセンス保持者の社内研究プロジェクトにのみ使用することができ、第三者への譲渡はできません。
  • p53 KO, apoe KO, ob/ob miceの納期については、通常は3～4週間ですが、状況によって更に長くなる場合があります。送料は別途発生します。

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  • ※価格及び、サービスの仕様・内容などにつきまして、予告なしに変更されることがあります。
  • ※表示している参考価格は消費税等は含まれておりません。
  • ※受託サービスは、すべて研究目的として作業を行います。その他の目的（医療品・食品の製造・品質管理や医療診断など）には使用しないで下さい。
  • ※納期は参考納期です。諸事情により、前後する場合がございます。納期の詳細については個別にお問い合わせください。
  • ※会社名・サービス名などは、各社の商標・登録商標です。
  • ※納品物によっては、その構成物（例えば、ベクター、蛍光色素など）の使用に制限がある場合があります。
  • ※ヒト臨床サンプルの場合はインフォームドコンセントを得ていることをご確認ください。 ヒト由来のサンプルの場合、ご所属の組織の倫理委員会などで承認が得られたものが受領されます。
  • ※人間への感染性が疑われるサンプルに関しては、お受けできない可能性がございます。
  • ※サンプルの保管および返却を行っていない場合があります。お客様より提供いただいたサンプルおよび解析データ等は、業務終了後、廃棄される場合がございます。

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