本サービスは、お客様の標的遺伝子についてセレクタ社でshRNA設計を行い、ご指定頂いたベクターをカスタマイズして配列を組み込んだshRNAコンストラクト、およびパッケージング済みウイルス粒子をご提供するサービスです。
単一の遺伝子に対して個別チューブで、あるいは多数の遺伝子に対してアレイ型shRNAライブラリーとして約2~6週間でお届けします。1遺伝子あたり1~100種程度のshRNA構築を行うことができますのでご希望のデザイン数をご指定ください。セレクタ社のレンチウイルスベクターより、蛍光マーカーや抗生物質耐性遺伝子、マーカー用プロモーターやshRNA用プロモーター、tet-制御型もしくは定常型shRNA発現などに応じて、発現ベクターをお選び頂きます。ダブルマーカーのレンチウイルスベクター構築も可能です。
カスタム構築したshRNAを、お客様ご希望の細胞および実験条件に準じ、qPCR法にて機能検証するサービスもございます。Cellecta社では、内在性ターゲットmRNAを70%以上抑制することを「機能検証済み」としていますが、お客様のご希望に応じて抑制率を90%と設定することも可能です(別途追加料金を申し受けます)。
お客様の目的に応じてライブラリーベクターのカスタマイズが可能です。
必要な情報
- 標的遺伝子情報(生物種(哺乳類のみ対応)、遺伝子名、RefSeqアクセッション番号)
- 遺伝子ごとのshRNA構築数:1~100構築(1遺伝子あたり3種類以上のshRNA構築を行うことをCLT社では推奨)
- (fig.1)よりクローニングベクターのカスタマイズのご希望
・選択マーカー:シングルもしくはダブルマーカー(GFP、RFP、Puro® 、Bleo® など)
・マーカー用プロモーター:UbiC、EF1、PGK、CMVなど
・shRNA用プロモーター:H1、U6
・shRNA発現形態:Tet-制御、定常発現
・shRNAカセット:バーコード化shRNA
(プール型shRNAライブラリーへコントロールとして加える場合に有用)
各shRNAはCellecta社独自のアルゴリズムを用いてデザイン致します。shRNAオリゴを合成後、お客様ご希望のベクターへ挿入し、Q.C.(シークエンス解析)を行います。偽ウイルス粒子へのパッケージングもオプションにて承ります。プラスミドまたはパッケージ済みレンチウイルス粒子(プラスミドを含む)を96ウェルプレートまたはチューブに分注してご提供致します。
見積価格および納期は、お選び頂いたオプションやプロジェクトの詳細により異なりますのでご了承ください。