概要
ご依頼の試料を用いてマクロファージを刺激した後、マクロファージの活性化を各種活性指標により、解析する受託サービスです。
マクロファージはすべての多細胞動物が持つ、自然免疫機能の中で、最も基盤となる異物を認識し、貪食して排除する細胞です。マクロファージの活性化より、生物本来が持つ生体恒常性維持能力を高め、感染症予防や、がんの排除、創傷治癒などの機能が亢進します。この活性化能を各種項目によって評価することで、サンプルの機能性を評価します。
マクロファージのNO産生試験
- マクロファージ細胞株（RAW264.7やNR8383、J774.1など）培養液中にご依頼の試料を添加し、24～72時間後の培養上清を回収します。一酸化窒素（NO）産生能として、上清中の亜硝酸量を、グリエル試薬を用いて測定します（fig.1）。
- ご依頼の試料をポリミキシンBと混合し、NO産生能を測定することも可能です。
＊ マクロファージは由来する組織により反応性が著しく異なります。
＊ 上記の各試験項目の
in vivo（マウス）での試験は、条件により対応可能な場合があります。詳しくはご相談ください。
マクロファージのNO産生（
fig.1）
ラット末梢血単球（PBM）と肺胞マクロファージ（AM）細胞株（NR8383）のNO産生能の比較。ラット末梢血から単球を回収した。細胞に
E. coli由来のLPSを各濃度（0.01～100ng/mL）添加し24時間後の培養上清を回収した。グリエル試薬を用いて、上清中の亜硝酸量を測定した。
マクロファージのTNF産生試験
マクロファージ細胞株（RAW264.7やNR8383、J774.1など）培養液中にご依頼の試料を添加し、3～24時間後の培養上清を回収します。上清中のTNF量はELISAによる測定のほか、L-929細胞傷害試験による測定も承っています（
fig.2）。
＊ 上記の各試験項目の
in vivo（マウス）での試験は、条件により対応可能な場合があります。詳しくはご相談ください。
マクロファージのTNF産生（
fig.2）
ラット肺胞マクロファージ（AM）細胞株（NR8383）のTNF産生能。
NR8383細胞に
E. coli由来のLPSを各濃度（0.1～1,000ng/mL）添加し3時間後の培養上清を回収した。L-929細胞傷害試験（アクチノマイシンD存在下）試験でTNF産生量を測定した。
マクロファージのサイトカイン産生試験
マクロファージ細胞株（RAW264.7やNR8383、J774.1など）培養液中にご依頼の試料を添加し、3～24時間後の上清中の、各種サイトカインのタンパク質量を市販のELISAキットを用いて定量いたします。
＊ 上記の各試験項目の
in vivo（マウス）での試験は、条件により対応可能な場合があります。詳しくはご相談ください。
マクロファージの貪食活性試験
マクロファージ細胞株（RAW264.7やNR8383、J774.1など）培養液中にご依頼の試料を添加して、回収した細胞に蛍光ラテックスビーズまたはザイモサンなどを貪食させて、マクロファージの割合、貪食した粒子数を測定します（
fig.3）。接着しただけのラテックスビーズはほぼ完全に除去されるため、非特異的な吸着による誤差がほとんどありません。
＊ 上記の各試験項目の
in vivo（マウス）での試験は、条件により対応可能な場合があります。詳しくはご相談ください。
ラテックスビーズの貪食（
fig.3）
NR8383 細胞に蛍光ラテックスビーズを貪食させた後、洗浄し、ギムザ染色をした。
矢印：ビーズ
