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ジェンスクリプトジャパン / ジェンスクリプトジャパン ID: J00289

CRISPRゲノム編集サービス ID: J00289

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CRISPR法に基づいた、哺乳類細胞株の遺伝子改変のためのゲノム編集サービスです

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サービスについて

概要

CRISPR（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）は元々、大腸菌ゲノムから同定され、DNAレベルで標的の外来遺伝子を破壊する、RNAベースの獲得免疫系の一部の機能として見つかったものです。CRISPR関連タンパク質（Cas）は外来DNAを切断するエンドヌクレアーゼで、宿主ゲノムへの取込みを可能にしています。この切断機能は侵入した外来DNAのターゲット配列周辺に「protospacer adjacent motif」（PAM）がある時にのみ生じ、高精度なターゲッティングを可能にします。 CRISPRの研究者はこの機構を応用し、ターゲット宿主ゲノムの遺伝子編集用のツールとして開発しました。CRISPR/Cas9は近年、その簡便さと汎用性から、人気のゲノム編集ツールとなっています。

ハイライト

  • デザインから機能評価まで対応
  • 専門チームで対応
  • 100種類以上の細胞株での成功実績

ワークフロー

宿主細胞株の評価：gRNAデザインおよび合成
  • クローン化試験
  • トランスフェクション最適化
  • プロモーター最適化
↓
細胞株構築
  • RNPベースのデリバリー
  • サンガーシークエンス
  • FACSとウェスタンブロット
↓
スクリーニングと検証
  • ハイスループットスクリーニング
  • 二重の確認
  • 複数の陽性クローン
    • ↓
    クロンの凍結保存とQC
    • セルバイキング
    • 細胞生存率およびマイコプラズマ試験
    • CoAレポート

    サービス仕様

    サービス名 サービス詳細 細胞株オプション 納品物 納期（輸送期間は含んでいません）
    GenCRISPRTMEZノックアウトサービス
    • 単一遺伝子ノックアウト細胞プール／シングル細胞株
    • 複数遺伝子ノックアウト細胞プール／シングル細胞株
    		 90以上のよく使用されるトランスフェクションに最適な細胞株を利用可能，A549、CHO-K1、HEK293、HEK293T、HT-29、MDA-MB-231、4T1、A20、HCT116、MCF7、MDCK、U937、RPMI 8866など
    • One knockout cell pool/two full-allelic knockout cell lines validated by sequencing
    • One negative control cell pool transfected with non-targeting gRNA
    • 2 xクライオバイアル/クローン
    • Biweekly project updates
    		 3～6週間（細胞プール）
    9～15週間（細胞クローン）
    GenCRISPRTMカスタムノックアウトサービス 8～11週間（細胞プール）
    16～24週間（細胞クローン）
    GenCRISPRTMカスタムノックインサービス
    • 点変異
    • シームレスな点変異
    • 内在性遺伝子座／遺伝子タグ付け／レポーター
    • 変異研究のための細胞モデル（SNV、SV、インデル、その他を含む）
    • GOIのセーフハーバー挿入
    		 細胞株の種類は問いません
    • 1-2 knock in cell lines validated by sequencing
    • One negative control cell pool transfected with non-targeting gRNA
    • Biweekly project updates
    		 12～25習慣（細胞クローン）
    GenCRISPRTM全遺伝子欠損サービス
    • 全遺伝子欠損
    		 Any cell line
    • シークエンシングで検証した、1種類のノックアウト細胞プール／2種類の全アレルノックアウト細胞株
    • 非ターゲティングgRNAでトランスフェクションした、1種類のネガティブコントロール細胞プール
    • 隔週ごとのプロジェクトアップデート
    		 13～23週間（細胞クローン）

    GenScript社でご希望の細胞株を所有していない場合、お客様の細胞株をご提供頂く形が望ましいですが、市販されている細胞株をGenScriptで購入させていただくことも可能です。（追加料金が必要になります） 現在、プライマリー細胞、幹細胞やiPS細胞のゲノム編集サービスは提供しておりません。
    CRISPR細胞株の検証サービスは、以下の”追加サービス”からご覧いただけます。

    追加サービス

    追加サービス 説明
    逆転写（RT）-PCR 陽性細胞プール／クローンのmRNAレベルでの検証
    フローサイトメトリー解析 導入遺伝子発現を、フローサイトメトリー解析で検証。ターゲットタンパク質またはレポータータグへ特異的に結合する、検証済抗体をご提供いただく必要がございます。
    ウェスタンブロット ウェスタンブロットによる陽性クローン検証。宿主細胞でターゲットタンパク質へ特異的に結合する、検証済抗体をご提供いただく必要がございます。
    発現安定性試験 15/20世代の目的遺伝子発現安定性をウェスタンブロットまたはフローサイトメトリーにより検証します。
    納品用クローン追加 追加納品用陽性クローンのＱＣと出荷用調製を行います。
    オフターゲット解析 上位5つの潜在的なオフターゲット部位をシークエンシング解析で、1種類のノックアウトクローンを評価します。

    ご注文に関して

    お問い合わせフォーム よりお問い合わせください。

    参考価格・納期

    サービス項目 価格（税抜） 納期
    CRISPRゲノム編集サービス お問い合わせ 上記をご確認ください

    関連サイト

    • ※価格及び、サービスの仕様・内容などにつきまして、予告なしに変更されることがあります。
    • ※表示している参考価格は消費税等は含まれておりません。
    • ※受託サービスは、すべて研究目的として作業を行います。その他の目的（医療品・食品の製造・品質管理や医療診断など）には使用しないで下さい。
    • ※納期は参考納期です。諸事情により、前後する場合がございます。納期の詳細については個別にお問い合わせください。
    • ※会社名・サービス名などは、各社の商標・登録商標です。
    • ※納品物によっては、その構成物（例えば、ベクター、蛍光色素など）の使用に制限がある場合があります。
    • ※ヒト臨床サンプルの場合はインフォームドコンセントを得ていることをご確認ください。 ヒト由来のサンプルの場合、ご所属の組織の倫理委員会などで承認が得られたものが受領されます。
    • ※人間への感染性が疑われるサンプルに関しては、お受けできない可能性がございます。
    • ※サンプルの保管および返却を行っていない場合があります。お客様より提供いただいたサンプルおよび解析データ等は、業務終了後、廃棄される場合がございます。

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