概要
組織試料の調製・泳動・転写・検出（化学発光）・スキャナーでによるスキャニングを行い、スキャンニングファイルをご提出する受託試験となります。
＊ シグナルの数値化による比較定量などはお引き受けしておりません。
特長
- お客様からのご要望に応じて、動物の解剖から画像ファイルの作成まで一貫してお引き受けいたします。
- 250kDa以下の分子量のタンパ ク質の解析を行います。
- 以下のような用途にご利用いただけます。
・目的タンパク質の臓器別での発現の確認
・目的タンパク質の発現量の変化（半定量）
・抗体のウエスタンブロットでの適用確認
正常マウス（ C57BL/6 ） 8週年齢 各 50ug total protein
1 ：脳 , 2 ：心臓 , 3 ：胃 , 4 ：肝臓 , 5 ：脾臓 , 6 ：肺 , 7 ：腎臓 , 8 ：膵臓 , 9 ：小腸 , 10 ：大腸
サービスの流れ
- 抗体反応確認試験
抗体をお客様でご用意ください。
ご提供いただいた抗体の特異性をチェックいたします。
正常マウスやラットでチェックできる抗体の場合、当社ストックのタンパク質をポジコンとして使用します。ご希望の臓器を2臓器までお知らせください。
マウスやラット以外の抗体の場合、お客様よりご提出いただいた試料（ポジコン）を用いて特異性をチェックします。
この時点で、特異性の確認が取れない場合は、解析終了となります。
- 本試験
試料数：1～12サンプル/メンブレン
マウス・ヒト試料の場合は、GAPDHもくしは、アクチンを用いた実験も同時に実施いたします。
試料数：13～24サンプルは、2枚目のメンブレンとなります。
タンパク定量
タンパク定量に関しましては、ジェノスタッフ社で実施することも可能です。
キットを用い、BCA法にてタンパク定量を行います。
＊ タンパク質の抽出に用いる多くの界面活性剤の存在下で安定してタンパク定量を行うことが可能です。
電気泳動・転写
- 試料をSDS-PAGEにて、電気泳動し、セミドライブロッティングによりメンブレンに転写します。
- 1ブロットにローディングできるのは、12検体までです。
- 泳動の順番などはご依頼時にご指定いただく事になります。
検出
ペルオキシダーゼ標識二次抗体を用いた化学発光により検出し、スキャナーで検出します。
その他
試験系のポジティブコントロールとして、目的抗体のウエスタンブロット後のメンブレンから目的抗体を除去し、ジェノスタッフ社が所有しておりますβアクチンなどのハウスキーピングタンパク質抗体での反応試験を実施致します。こちらは試験系のコントロールとなりますのでターゲットタンパク質の量を補正・比較する目的ではございません。発現量の違いにより検体毎にシグナル強度が異なる可能性もありますことをご了承いただけますようお願いいたします。
