特長
- 長鎖解析が可能！ 1,000bpまで読み取り可能
- WEB納品でお届けします
概要
鋳型DNAとプライマーをあらかじめ混合したサンプルを8連チューブもしくは96ウェルプレートでご提供いただき、プライマー混合済み鋳型DNAから塩基配列解析を行います。解析データをウェブサイトからダウンロードしていただくことにより、迅速・簡単に解析結果をご確認いただけます。
8連チューブ単位もしくは96ウェルプレート単位で、プライマー混合済み鋳型DNAから塩基配列解析を行います。納品はウェブサイト経由（WEB納品）で行います。
納品物
- 波形ファイル （AB1）
- 配列テキストデータ （TXT）
・WEB納品いたします。USB納品の場合には別途料金を申し受けます。
・メールにて納品をお知らせします。1週間以内にWEB会員IDとパスワードでデータをダウンロードしてください。
受入サンプル
鋳型とシーケンスプライマーを以下の通り混合し、タカラバイオへ送付してください。
|
鋳型量 |
プライマー量 |
全液量 |
| プラスミドDNA |
約300～600ng |
7.5pmoles |
15μL/ウェル（滅菌水） |
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DNA長 |
鋳型量 |
プライマー量 |
全液量 |
| PCR産物 |
200～500bp |
10～90ng |
7.5pmoles |
15μL/ウェル（滅菌水） |
| 501～1,000bp |
10～120ng |
7.5pmoles |
15μL/ウェル（滅菌水） |
| 1,001～3,000bp |
20～150ng |
7.5pmoles |
15μL/ウェル（滅菌水） |
| 3,001bp以上 |
40～180ng |
7.5pmoles |
15μL/ウェル（滅菌水） |
（例）プラスミドDNA濃度100ng/μL、プライマー濃度10pmol/μLの場合
DNA 4μL（400ng）＋プライマー0.75μL（7.5pmoles）＋滅菌水10.25μLを1つのウェルに分注
- PCR産物は精製後、プライマーと混合してください。
- クルードな鋳型を増幅するようなPCRキットをご使用の場合には、バッファー交換を伴う精製を行うことを推奨します（シーケンス反応阻害により、結果が得られない場合があります）。
- プライマーは標識していないものをご使用ください。Dye Terminator法にて解析いたします。
- 96ウェルプレートの場合、H11とH12のウェルを空ウェルとしてください（ポジティブコントロール用として使用します）。
- 8連チューブの場合には空ウェルは不要です。
- タカラバイオでは、ご提供いただいたサンプルから直接シーケンス反応（BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit）を行い、DNAシーケンサー（Applied Biosystems 3730xl DNA Analyzer）による解析を行います。タカラバイオによる機器・試薬および操作に起因する解析不良以外は、再解析は行いませんので、あらかじめご了承ください。
- PCR産物長が、150bp以下の短い産物では解析が困難な場合があります。特に100bp以下の場合はサブクローニング後のシーケンス解析をおすすめいたします。
- 関連情報も合わせてご確認ください。
