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フィルジェン / フィルジェン ID: J01110

Phospho-Specific Antibody Arrays 受託解析サービス ID: J01110

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各研究フィールド別に関連したタンパク質群のリン酸化を調べられる様につくられた32種の「Phospho-Specific Antibody Arrays」を用いた解析

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サービスについて

特長

  • Full Moon Biosystems社製の網羅的にタンパク質群のリン酸化を調べられる様につくられた「Phospho Explorer Antibody Array」と、各研究フィールド別に関連したタンパク質群のリン酸化を調べられる様につくられた32種の「Phospho-Antibody Arrays」を用いて、フィルジェン受託解析センター内において、リン酸化解析を行います。32～1,318種類の抗体を搭載したアレイで（リン酸化抗体と、非リン酸化抗体をペアで搭載）、タンパク質のリン酸化解析を少量サンプル（組織・細胞）で一度に行えます。
  • マウスやラットとの交差性については、搭載抗体リストをご確認ください。
  • 抗体がデュプリケート（2～6重）でスポットされています。
  • Full Moon BioSystems社独自の三次元ポリマースライドを使用することにより、結合効率が高く、特異性の高い解析が可能です。
  • 組織や細胞から抽出したタンパク質をビオチン標識してアプライし、「Cy3-ストレプトアビジン」で検出します。

サービス内容

  • 測定原理（fig.1）

    • fig.1 測定原理
  • ラインナップ

    ラインナップ搭載抗体数
    （リン酸化抗体＋
    非リン酸化抗体）    		Reactivity
    Phospho Explorer Antibody Array1,318Human99% / Mouse92% / Rat66%
    AKT/PKB Signaling Phospho Antibody Array216Human100% / Mouse90% / Rat78%
    AMPK Signaling Phospho Antibody Array174Human100% / Mouse89% / Rat77%
    Apoptosis Phospho Antibody Array247Human100% / Mouse89% / Rat65%
    Cancer Signaling Phospho Antibody Array248Human100% / Mouse88% / Rat68%
    Cancer/Apoptosis Phospho Antibody Array155Human100% / Mouse79% / Rat68%
    Cell Cycle Phospho Antibody Array76Human100% / Mouse65% / Rat53%
    Cell Cycle Control Phospho Antibody Array238Human100% / Mouse85% / Rat57%
    Cell Signaling Phospho Antibody Array304Human99% / Mouse87% / Rat66%
    CREB Phospho Antibody Array174Human100% / Mouse90% / Rat82%
    Cytoskeleton Phospho Antibody Array141Human100% / Mouse100% / Rat81%
    EGF Pathway Phospho Antibody Array214Human100% / Mouse96% / Rat83%
    ErbB/Her Signaling Phospho Antibody Array239Human100% / Mouse98% / Rat89%
    ERK Signaling Phospho Antibody Array208Human100% / Mouse96% / Rat83%
    GPCR Signaling to MAPK/ERK Phospho Antibody Array193Human99% / Mouse95% / Rat81%
    IGF-1R Signaling Phospho Antibody Array245Human100% / Mouse93% / Rat76%
    Insulin Receptor Phospho Antibody Array219Human100% / Mouse97% / Rat84%
    Jak/Stat Pathway Phospho Antibody Array42Human100% / Mouse93% / Rat86%
    Jak/StatⅡ Pathway Phospho Antibody Array202Human100% / Mouse96% / Rat86%
    MAPK Pathway Phospho Antibody Array185Human100% / Mouse85% / Rat71%
    mTOR Signaling Phospho Antibody Array138Human100% / Mouse97% / Rat83%
    Neuroscience Phospho Antibody Array167Human98% / Mouse95% / Rat91%
    NF-kBⅡ Pathway Phospho Antibody Array215Human100% / Mouse94% / Rat55%
    p53 Signaling Phospho Antibody Array196Human100% / Mouse84% / Rat61%
    T-Cell Receptor Signaling Phospho Antibody Array213Human100% / Mouse94% / Rat62%
    TGF-beta Signaling Phospho Antibody Array176Human100% / Mouse97% / Rat87%
    VEGF Pathway Phospho Antibody Array185Human100% / Mouse95% / Rat84%
    Tyrosine Kinase Adaptors Phospho Antibody Array98Human100% / Mouse94% / Rat89%
    Tyrosine Phosphorylation ProArray228Human100% / Mouse95% / Rat62%
    Wnt Signaling Phospho Antibody Array227Human100% / Mouse92% / Rat80%

    ＊ 搭載抗体数は、リン酸化抗体と非リン酸化抗体を合わせた数です。

  • Performance（fig.2）

    fig.2 Performance
    AKT Phospho-Specific Antibody Array - Lysates from control and treated H522 cells were labeled with biotin and detected with Cy3-Streptavidin. For proteins PTEN（Ser380）and c-Jun（Thr91）, the phosphorylation change between the control sample and treated sample was 5.59 folds and 4.23 folds respectively.
  • 実験の流れ

    1. お預かりした組織や細胞から、タンパク質を抽出
      お送り頂いた、組織や細胞などから、タンパク質を抽出します。
    2. タンパク質の濃度測定
      抽出したタンパク質量を、BCA（Bicinchoninic Acid）法により確認します。
      解析可能なタンパク質量に満たない場合には、下記いずれかをご選択ください。
      ・追加サンプルにて再度抽出（￥40,000（税抜）/サンプルをご請求させて頂きます。）
      ・回収されたタンパク質のみで解析を継続（結果如何によらず解析サンプル分の通常価格をご請求させて頂きます。）
      ・解析の中止（この段階までの作業料やキット代金などをご請求させて頂きます。ご請求金額につきましては、お問い合わせ下さい。）
    3. タンパク質のビオチン化
      タンパク質をビオチン化します。
    4. ビオチン化タンパク質のアレイへの添加、抗原抗体反応、洗浄作業
      ビオチン化タンパク質をアレイにアプライして抗原抗体反応をさせ、その後洗浄をします。
    5. Cy3-Streptavidinのアレイへのアプライ、ビオチン-アビジン反応、洗浄作業
      Cy3-Streptavidinをアレイへアプライして、ビオチン-アビジン反応させ、その後洗浄をします。
    6. スキャンニング
      GenePix® 4100Aにて、蛍光発光画像を読み取ります。
    7. 画像データ解析
      GenePix®で読み取った画像データから、Array-Pro Analyzer®にて、スポット部分を数値データ（Excel）に落とし込みます。数値化データをもとに、データ補正、データ比較（同一アレイ内の非リン酸化抗体とリン酸化抗体のスポットのシグナルを比較します。）などを行います。画像データ、解析数値データ（Excel）をCDに焼き付けます。
    8. データCD発送
      データCDをケースに入れ、開封確認シール（開封したらわかる様にするためのシール）を貼った上で、ファイルケースに入れ、ビニールケースでさらに密封し、直送あるいは、代理店様へご発送致します。

必要サンプル量

サンプル ご送付量 ビオチン標識に用いるタンパク質量について サンプル調整方法
細胞 5×106～2×107個 >30～100μg（min.30μg）（＊1） 細胞を1×PBS 2mLで2回洗浄後（2,000rpmで2分遠心）に上清を捨て、液体窒素で凍結後、ペレットを-80℃以下に保存。（チューブは液体窒素耐性のあるものをご使用ください。）
組織 40～100mg >30～100μg（min.>30μg）（＊1） 組織を摘出後、直ちに小片に切り分け、重さを量る。組織片をチューブ（液体窒素耐性のあるもの）に移し、直ちに液体窒素で凍結後、-80℃以下に保存。
細胞培養上清 >35μL >5～12μg（min.1.6μg/μL）（＊2） 細胞培養液を回収し、遠心により固形物を除去し、-20℃以下に保存してください。凍結融解の繰り返しは避けてください。
血清 ＞20μL >25～75μg/μL（min.10μg/μL）（＊2） 血清分離用チューブをご使用ください。また、血液を30分程度放置して凝固させ、遠心分離後上清を分取し、直ちに-20℃以下に保存してください。凍結融解の繰り返しは避けてください。
血漿 ＞20μL >25～75μg/μL（min.10μg/μL）（＊2） 抗血液凝固剤（EDTA、ヘパリン、クエン酸Naなど）で処理した血液を、遠心分離後上清を分取し、-20℃以下に保存してください。凍結融解の繰り返しは避けてください。

＊1 組織または細胞の場合、タンパク質抽出及びBuffer Exchange/Lysate Purification工程（カラムによるBuffer置換）を行います。
　　本工程後のタンパク質30～100μg程度（min.30μg程度）を目安に分取し、ビオチン標識・ハイブリダイゼーションを行います。
＊2 細胞培養上清・血清または血漿の場合、融解・遠心処理後の上清を分取し、Buffer Exchange/Lysate Purification工程を行わず、
　　以下の容量を目安に分取し、ビオチン標識・ハイブリダイゼーションを行います。サンプル中の含有成分によっては、
　　タンパク質のビオチン標識が阻害される可能性がありますので、予めご了承ください。
　　・細胞培養上清の場合、融解・遠心処理後の上清25μL程度を分取します。
　　・血清又は血漿の場合、融解・遠心処理後の上清4μL程度を分取します。
† 上記サンプルご送付量は、あくまでも目安となります。測定サンプル種によっては、タンパク質そのものや解析対象となる
　 タンパク質の含有量が極端に少ない場合がありますので、ご注意下さい。ビオチン標識に用いるタンパク質量は、
　 推奨範囲の最大量にて行うことをおすすめします。上記をご参照の上、なるべく高濃度のタンパク質を含むサンプルをご準備ください
† ご送付サンプル中の含有タンパク質量または濃度（抽出またはBuffer置換後のタンパク質量または濃度）が規定最低量に満たないと
　 判断した場合については、「実験の流れ　2.」をご参照下さい。

ご注文に関して

お問い合わせフォーム よりお問い合わせください。

参考価格・納期

  • Phospho-Specific Antibody Arrays 受託解析サービス

    商品名 最少発注単位 価格（税抜）/サンプル Cat.#
    Phospho Explorer Antibody Array 2サンプル以上 ￥440,000 F-PEX100-1
    AKT/PKB Signaling Phospho Antibody Array ￥280,000 F-PAB216-1
    AMPK Signaling Phospho Antibody Array ￥267,000 F-PAM174-1
    Apoptosis Phospho Antibody Array ￥292,000 F-PAP247-1
    Cancer Signaling Phospho Antibody Array ￥295,000 F-PCS248-1
    Cell Cycle Phospho Antibody Array ￥229,000 F-PCC076-1
    Cell Cycle Control Phospho Antibody Array ￥287,000 F-PCC238-1
    Cell Signaling Phospho Antibody Array ￥319,000 F-PCS300-1
    CREB Phospho Antibody Array ￥267,000 F-PCR174-1
    CytoskeletonⅡ Phospho Antibody Array ￥255,000 F-PCP141-1
    EGF Pathway Phospho Antibody Array ￥280,000 F-PEG214-1
    ErbB/Her Signaling Phospho Antibody Array ￥287,000 F-PER239-1
    ERK Signaling Phospho Antibody Array ￥284,000 F-PEK208-1
    GPCR Signaling to MAPK/ERK Phospho Antibody Array ￥275,000 F-PGP193-1
    IGF-1R Signaling Phospho Antibody Array ￥292,000 F-PIR245-1
    Insulin Receptor Phospho Antibody Array ￥280,000 F-PIG219-1
    Jak/Stat Pathway Phospho Antibody Array ￥212,000 F-PJS042-1
    Jak/StatⅡ Pathway Phospho Antibody Array ￥270,000 F-PJS202-1
    MAPK Pathway Phospho Antibody Array ￥270,000 F-PMK185-1
    mTOR Signaling Phospho Antibody Array ￥255,000 F-PMT138-1
    Neuroscience Phospho Antibody Array ￥264,000 F-PNS170-1
    NF-kBⅡ Signaling Phospho-Specific Antibody Array ￥280,000 F-PNK215-1
    p53 Signaling Phospho-Specific Antibody Array ￥275,000 F-PFT196-1
    TGF-beta Signaling Phospho-Specific Antibody Array ￥267,000 F-PTG176-1
    VEGF Pathway Phospho-Specific Antibody Array ￥270,000 F-PVE185-1
    Tyrosine Kinase Adaptors Phospho-Specific Antibody Array ￥240,000 F-PTK098-1
    Tyrosine Phosphorylation ProArray ￥284,000 F-PST228-1
    Wnt Signaling Phospho-Specific Antibody Array ￥284,000 F-PNT227-1

    オプション

    サービス内容 タンパク質の種類 サンプル数 価格（税別）/サンプル Cat.#
    Fullmoon社製 抗体アレイ用 タンパク質抽出サービス 組織 / 培養細胞 4サンプル以下 ￥10,000 F-EXPRO-FM
    5サンプル以上 ￥8,000

    ＊ Phospho-specific Antibody Microarraysは、単色法のみで使用でき、2色法では使用できません。
    ＊ 上記価格には、抗体アレイ、スキャンニング、画像数値化、比較データ作成の費用も含まれております。

  • スキャンニング・画像数値化・比較データ作成のみの場合（実験済みアレイをご送付頂く場合）

    サービス名数量価格（税抜）納期Cat.#
    スキャンニングサービススライド1枚￥40,000お問い合わせF-SCAN
    画像数値化サービススライド1枚￥70,000お問い合わせF-FM-DATA
    スキャンニング＋画像数値化サービススライド1枚￥100,000お問い合わせF-FM-SCN
    比較データ作成サービス1比較￥15,000お問い合わせF-DR

関連サイト

  • ※価格及び、サービスの仕様・内容などにつきまして、予告なしに変更されることがあります。
  • ※表示している参考価格は消費税等は含まれておりません。
  • ※受託サービスは、すべて研究目的として作業を行います。その他の目的（医療品・食品の製造・品質管理や医療診断など）には使用しないで下さい。
  • ※納期は参考納期です。諸事情により、前後する場合がございます。納期の詳細については個別にお問い合わせください。
  • ※会社名・サービス名などは、各社の商標・登録商標です。
  • ※納品物によっては、その構成物（例えば、ベクター、蛍光色素など）の使用に制限がある場合があります。
  • ※ヒト臨床サンプルの場合はインフォームドコンセントを得ていることをご確認ください。 ヒト由来のサンプルの場合、ご所属の組織の倫理委員会などで承認が得られたものが受領されます。
  • ※人間への感染性が疑われるサンプルに関しては、お受けできない可能性がございます。
  • ※サンプルの保管および返却を行っていない場合があります。お客様より提供いただいたサンプルおよび解析データ等は、業務終了後、廃棄される場合がございます。

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